At4g32850 (PAPS4) ORF Clone

别称：PAPS4; NPAP; At4g32850; T16I18.60

产品类型：ORF克隆载体

基因ID：At4g32850

转录本：AT4G32850.8

载体：pLinker1

抗性：kanR

ORF 长度：2226 bp

蛋白长度：741 aa

蛋白分子量：83943 Da

片段物种：拟南芥（Arabidopsis thaliana）

NCBI gene ID：829421

Uniprot ID：Q8VYW1 

基因摘要

Encodes a nuclear poly(A) polymerase. Located in the nucleus. The mRNA is cell-to-cell mobile.

ORF 核苷酸序列

>At4g32850 (PAPS4) ORF Clone

CTTAAGCTCGGTACCAAGCTTCCTCGAGGGCGCGCCCCGCGGAGATCTTCTAGAGAT

ATGATGGTGGGTACTCAAAATTTAGGTGGTTCGTTGCCGCCGCTGAATTCTCCTAAAAGCTATGGAATTACGAAGCCGCTCTCTCTTGCTGGGCCTTCTTCGGCGGATATTAAGCGTAATGTGGAGCTGGAGAAGTACTTGGTTGATGAGGGACTCTACGAGAGCAAGGATGATACCATGCGGCGAGAGGAAGTTCTAGGACGCATCGATCAGATTGTAAAGCACTGGGTGAAACAGTTAACGCAGCAAAGAGGATATACTGATCAGATGGTGGAAGATGCAAATGCTGTCATTTTCACCTTTGGATCCTACCGACTTGGCGTGCATGGTCCTGGGGCTGACATTGATACTTTGTGTGTTGGGCCATCTTATGTTAACCGGGAGGAGGATTTCTTCATCATCTTGCATGATATATTGGCTGAGATGGAAGAAGTGACTGAGCTCCATCCTGTTCCCGATGCCCATGTTCCGGTCATGAAATTTAAGTTTCAAGGAATACCGATTGATCTGCTCTATGCTAGCATATCACTTTTAGTTGTGCCACAGGATCTGGATATCTCCAGCTCTTCTGTGCTGTGTGAAGTTGATGAGCCAACCGTTCGAAGTCTTAATGGTTGTAGAGTTGCTGATCAGATTCTTAAACTCGTTCCAAATTTTGAGCACTTCCGGACAACCTTAAGATGCCTGAAGTACTGGGCTAAGAAGCGTGGGGTGTATTCAAATGTGACTGGATTTCTTGGCGGTGTAAACTGGGCACTTTTGGTTGCTCGTGTCTGCCAGCTTTATCCAAATGCAATTCCTAGTATGCTGGTTTCTCGTTTTTTTAGAGTATATACTCAATGGCGGTGGCCGAACCCAGTCATGCTTTGTGCAATAGAAGAGGATGAGCTTGGATTTCCTGTCTGGGACCGTCGTAAGAATCATCGCGACCGCTATCACCTTATGCCAATAATAACTCCAGCTTACCCATGCATGAATTCTAGTTACAATGTCTCTCAAAGCACTCTTCGCGTTATGACAGAGCAGTTCCAGTTTGGTAACAATATCTTGCAGGAGATTGAATTAAATAAACAGCACTGGAGCTCTTTATTTGAACAATATATGTTTTTCGAGGCATACAAAAACTACCTTCAGGTTGATATAGTGGCAGCAGATGCAGAAGATTTATTGGCTTGGAAGGGTTGGGTGGAGTCGCGGTTCAGACAGCTGACCTTAAAGATAGAAAGAGACACTAATGGGATGTTAATGTGCCATCCCCAACCAAATGAGTATGTAGACACGGCTAGGCAGTTTCTGCATTGTGCCTTTTTCATGGGCTTGCAGAGGGCAGAGGGAGTTGGGGGTCAAGAATGTCAACAGTTTGATATACGTGGTACTGTCGATGAGTTCAGACAAGAAGTAAACATGTATATGTTTTGGAAACCTGGGATGGATGTTTTCGTTTCTCATGTTCGTAGACGACAGCTTCCACCTTTTGTTTTCCCTAATGGATATCGAAGGCCTCGGCAGTCCAGGCACCAAAATCTACCGGGTGGAAAATCTGGTGAAGATGGCAGTGTTTCTCATTCCGGCTCTGTGGTGGAGAGGCATGCCAAGCGAAAGAACGATAGTGAAATGATGGATGTGAGGCCAGAGAAACCTGAGAAGCGTGCATCTCTTAGTCCACAGAGTCTAGATATAGTTTCTCCTGAAAATAGTGCTATCACAACTGGTTGGACTCCTCCTGTTTGCAACCTTAGAAGGCCACCAAGCGAGGAAATAGAAGCTGATAATTTGAACACTGAGTGTACTGAACTCACAGACTTAGCTCGAAATGAGTGTAACTCTGGCAGCGAGCAAGTTCTTGAAGTAGATAGTATGGCTGTAGTTCAAGAATGCTCTGATCCTGCTGAGCCTTTGGGAAAGTGTGTAACACCTGACTCTGTTGATGTGGTAGCATGTGTAAGTGGGCAGGAAGAAAACTTAGATCGTAATTTGAGGTCTGTATCCATCAGTGGTACTGACTCCCCACTTCTTCCGAGCAGATCCTGTGGGCAGAACCGTGATTATGAGGGTTTCGGGTTTCCTGCTGCAAATTCAGATCCTATGGGAAAGAAAAACTTGTACTCTCAAAGCGGCATGTCGGAAGACCTTCAGTCAAACTCTTTGGTGAGCGGGATGGAGAAGTCGGAAGACAGAGCTAGGTCAGAATCTTTCCAGAAGTCACAGATAAGGCATGCTATTGACGTGAAGAAAACGGGGGATTTCAACTCAAATTGTTGCGTTGGACAGACGACAGAGTCCAGAAGCTTTTGGTAA

ATCGAATTCGGGCCCACTAGTCCTGCAGGCGGCCGGGATCCGAGCTC

黑色：载体序列、红色：同源重组序列、蓝色：ORF序列

蛋白简介

Essential protein (PubMed:19956626). Polymerase that creates the 3'-poly(A) tail of mRNA's (PubMed:15297145). Also required for the endoribonucleolytic cleavage reaction at some polyadenylation sites. May acquire specificity through interaction with a cleavage and polyadenylation specificity factor (CPSF) at its C-terminus (By similarity).

蛋白质序列

>Nuclear poly(A) polymerase 4 (AtPAP(IV)) (PAP(IV)) (Poly(A) polymerase IV) (nPAP) (EC 2.7.7.19) (Polynucleotide adenylyltransferase 4)

MMVGTQNLGGSLPPLNSPKSYGITKPLSLAGPSSADIKRNVELEKYLVDEGLYESKDDTMRREEVLGRIDQIVKHWVKQLTQQRGYTDQMVEDANAVIFTFGSYRLGVHGPGADIDTLCVGPSYVNREEDFFIILHDILAEMEEVTELHPVPDAHVPVMKFKFQGIPIDLLYASISLLVVPQDLDISSSSVLCEVDEPTVRSLNGCRVADQILKLVPNFEHFRTTLRCLKYWAKKRGVYSNVTGFLGGVNWALLVARVCQLYPNAIPSMLVSRFFRVYTQWRWPNPVMLCAIEEDELGFPVWDRRKNHRDRYHLMPIITPAYPCMNSSYNVSQSTLRVMTEQFQFGNNILQEIELNKQHWSSLFEQYMFFEAYKNYLQVDIVAADAEDLLAWKGWVESRFRQLTLKIERDTNGMLMCHPQPNEYVDTARQFLHCAFFMGLQRAEGVGGQECQQFDIRGTVDEFRQEVNMYMFWKPGMDVFVSHVRRRQLPPFVFPNGYRRPRQSRHQNLPGGKSGEDGSVSHSGSVVERHAKRKNDSEMMDVRPEKPEKRASLSPQSLDIVSPENSAITTGWTPPVCNLRRPPSEEIEADNLNTECTELTDLARNECNSGSEQVLEVDSMAVVQECSDPAEPLGKCVTPDSVDVVACVSGQEENLDRNLRSVSISGTDSPLLPSRSCGQNRDYEGFGFPAANSDPMGKKNLYSQSGMSEDLQSNSLVSGMEKSEDRARSESFQKSQIRLLT

关键词

Alternative splicing; ATP-binding; Magnesium; Metal-binding; mRNA processing; Nucleotide-binding; Nucleotidyltransferase; Nucleus; Reference proteome; Transferase


质粒图谱

产品说明

本产品是经过离子交换柱纯化后，装在无菌冻存管中通过真空干燥获得的2 μg连有At4g32850 (PAPS4) 基因ORF的质粒DNA干粉。

保存：-20 ℃

使用说明        

1、以5000 × g离心5 min；

2、打开冻存管，加入20 μL无菌水溶解DNA，并在室温下孵育10 min；

3、短暂涡旋冻存管，然后瞬时离心 (小于5000 × g)。

4、质粒溶液在-20℃下可稳定保存一年，请避免反复冻融。


扩增方案

1、收到质粒干粉后请先5000 rpm离心1 min，再加入20 μL无菌水溶解质粒，室温放置1 min；

2、从-80 °C冰箱中取出相应的感受态，置于冰盒上解冻，并做好标记；

3、取2 μL质粒加至100 μL感受态中，冰浴30min;

4、42 °C热激90 s，再冰浴2 min;

5、加入900 μL无抗的LB液体培养基，200 rpm震荡培养45 min;

6、5000 rpm离心5 min，仅留100 μL上清混匀菌体沉淀；

7、混匀后的菌液加至对应抗性的LB平板上，倒入适量玻璃珠，涂匀液体；

8、将平板正向培养1 h，再倒置培养12 h～16 h;

9、挑取单克隆菌落至对应抗性的LB液体培养基中，震荡培养12 h~16 h，根据实验需要提取质粒。

注意事项

1、同一个基因的单个转录序列可能由于发生自然变异 (例如核苷酸多态性)而有所不同，每一种都有其自身有效的存在。

2、该克隆被工程化，但表达取决于基因的性质。

3、本产品仅限于科学研究，不得用于临床诊断或治疗，不得用于食品或药品。

4、为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。