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2 × Taq DNA Polymerase PCR Mix

Taq DNA Polymerase是一种来源于嗜热菌Thermus aquaticus的高度热稳定的DNA聚合酶,95 ℃孵育时的半衰期大于40 分钟。Taq酶的分子量为94 kDa。Taq 酶可以催化5' 至3' 方向的依赖于DNA模板的脱氧核苷酸的聚合。Taq酶没有3' 至5' 的外切酶活性,有非常低的5' 至3' 外切酶活性。由于Taq酶没有3' 至5' 的外切酶活性,因此在DNA聚合过程中相当于核苷酸转移酶的作用,最终会导致PCR产物的3' 末端会产生 3'-dA overhangs,即产生带一个A的3' 粘端。
2 × Taq DNA Polymerase PCR Mix 是预混型2 × Mix,只需加入模板和引物即可进行扩增,大大简化了操作过程。本产品中含有电泳指示染料,PCR 产物可直接进行电泳。另外,该产品还含有特异保护剂,使得预混液反复冻融后仍可维持稳定活性。
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      -20℃
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      2年
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  • 产品编号: QR1025             

     

    制品内容

    2 × Taq DNA Polymerase PCR Mix              1 ml

     

    产品简介

    Taq DNA Polymerase是一种来源于嗜热菌Thermus aquaticus的高度热稳定的DNA聚合酶,95 ℃孵育时的半衰期大于40 分钟。Taq酶的分子量为94 kDaTaq 酶可以催化5' 3' 方向的依赖于DNA模板的脱氧核苷酸的聚合。Taq酶没有3' 5' 的外切酶活性,有非常低的5' 3' 外切酶活性。由于Taq酶没有3' 5' 的外切酶活性,因此在DNA聚合过程中相当于核苷酸转移酶的作用,最终会导致PCR产物的3' 末端会产生 3'-dA overhangs,即产生带一个A3' 粘端。

    2 × Taq DNA Polymerase PCR Mix 是预混型2 × Mix,只需加入模板和引物即可进行扩增,大大简化了操作过程本产品中含有电泳指示染料,PCR 产物可直接进行电泳。另外,该产品还含有特异保护剂,使得预混液反复冻融后仍可维持稳定活性。

     

    保存及保质期-20 °C2年。

     

    使用方法

    PCR反应体系的设置:

    1)推荐反应体系:

    组分

    使用量

    Primer1 (10 µM)

    1 μL

    Primer2 (10 µM)

    1 μL

    模板 DNA

    X μL

    2 × Taq DNA Polymerase PCR Mix

    15 μL 

    ddH2O

    Up to 30 µl

     

    2)推荐反应程序:

    温度

    时间

    循环数

    95℃

    3 min(预变性)

     

    95℃

    15 sec

    30 - 35 cycles

    60℃

    15 sec

    30 - 35 cycles

    72℃

    60 sec/kb

    30 - 35 cycles

    72℃

    5 min(彻底延伸)

     

     

    用途

    1PCR扩增;

    2DNA标记;

    3)测序。

     

    注意事项

    1. 添加PCR反应体系时,不同模板最佳反应浓度不同;
    2. 退火温度需要根据引物的Tm值进行调整,一般设置成低于引物Tm3 ~ 5℃即可;对于复杂模板,需要调节退火温度和延长延伸时间来实现高效扩增
    3. 由于PCR反应非常灵敏可以扩增目的基因序列超过1000万倍,在使用Taq酶时请注意避免微量待扩增DNA的污染,并尽量考虑设置不加模板的空白对照以确认是否有待扩增DNA的污染
    4. 本产品仅限于专业人员的科学研究使

     

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