Os06g37300 (CYP701A8) ORF Clone

产品内容

pLinker1-Os06g37300-----------------------2 μg

TE buffer--------------------------------------500 μl

产品信息

产品名称：Os06g37300 (CYP701A8) ORF Clone

产品货号：QO06g37300

别称：CYP701A8; KO1; Os06g0569500; LOC_Os06g37300; OSJNBa0062E01.27

产品类型：ORF克隆载体

基因ID ( MSU )：LOC_Os06g37300

基因ID ( RAP )：Os06g0569500

转录本：LOC_Os06g37300.1

基因定位：Chr6 22020840 bp - 22028146 bp

载体：pLinker1

抗性：kanR

ORF 长度：1533 bp

蛋白长度：510 aa

蛋白分子量：56965 Da

片段物种：水稻（Oryza sativa）

Uniprot ID：Q0DBF4

拟南芥同源基因：AT5G25900

基因摘要

LOC_Os06g37300 encode cytochrome P450, putative, expressed

ORF 核苷酸序列

>Os06g37300 (CYP701A8) ORF Clone

ACGCTAGCATGGATGTTTTCCCAGTCACGACGTTGTAAAACGACGGCCAGTCTTAAGCTCCAGTGAATTCGAGCTCGGTACCTCGCGAATGCATCTAGATATC

ATGGAGTCGATGCTCGTAGCCGGAGCGGGCGCGGCGGCGGTGGCGGCCGTCGGGGGCCTCGTCGCGGCGGCCGCGCTCGCCGACAAGCTCGTCGCGGCGCCGCCGCCGCGCAAGAACCGCGCCAACCCGCCTCCAGCTGTTCCTGGTTTACCCATTATTGGAAATCTGCATCAATTGAAAGAAAAGAAGCCTCATCAGACGTTTGCAAAATGGTCTGAAACTTATGGACCAATCTACACTATAAAGACCGGAGCTTCTCCAGTGGTTGTGCTCAATTCAACTGAAGTAGCCAAGGAGGCGATGATTGACAAATTCTCATCCATATCTACTCGAAAGCTACCAAAAGCAATGTCTGTGCTAACTCGTAAAAGTATGGTCGCAATCAGCGACTACGGTGACTACCAAAAGATGGCGAAGCGTAATATTATGATTGGCATGTTAGGTTTTAATGCACAGAAACAGTTTCGCGGTACAAGAGAGAGGATGATCAGTAACGTGTTAAGCACTTTGCATAAGTTGGTTTCTCTTGACCCACATTCCCCTCTGAACTTCAGGGATGTTTACATTAATGAGCTGTTCAGCTTGTCCTTGATCCAGAGTTTAGGTGAGGATGTGAGTTCAGTTTATGTGGAAGAGTTTGGGAGGGAGATATCCAAGGACGAAATCTTTGATGTCCTTGTGCATGAGATGATGATGTGTGCAGTTGAGGCTGACTGGAGGGACTACTTCCCCTACCTCAGCTGGCTTCCAAACAAGAGCTTCGACACAATTGTGTCTACTACAGAATTCAGACGAGATGCTATCATGAATGCATTGATCAAGAAGCAGAAGGAGAGGATTGCACGCGGAGAGGCAAGGGCATCCTACATTGACTTCTTGCTGGAAGCTGAGAGGAGTGCACAGCTGACAGATGACCAACTGATGCTGCTGCTGTCGGAGTCCATCCTGGCTGCAGCTGATACTGTCCTGGTGACCACCGAATGGACCATGTATGAGATTGCCAAGAACCCTGACAAACAGGAGCTACTCTACCAAGAGATCCGAGAGGCGTGCGGCGGCGAGGCGGTGACCGAGGACGACTTGCCGCGGCTGCCGTACCTCAACGCCGTGTTCCACGAGACGCTGCGGCTGCACTCCCCGGTGCCGGTGCTGCCCCCGAGGTTCGTCCACGACGACACCACGCTCGCCGGCTACGACATCGCGGCGGGCACCCAGATGATGATCAACGTGTACGCGTGCCACATGGACGAGAAGGTGTGGGAGTCGCCGGGGGAGTGGTCGCCGGAGAGGTTCCTCGGCGAGGGGTTCGAGGTGGCGGACAGGTACAAGACGATGGCGTTCGGCGCCGGGAGGAGGACCTGCGCGGGGAGCCTGCAGGCGATGAACATCGCGTGCGTCGCCGTGGCGCGCCTCGTGCAGGAGCTCGAGTGGAGGCTGAGGGAGGGCGACGGGGACAAGGAGGACACCATGCAGTTCACCGCCTTGAAGCTTGACCCGCTGCATGTCCACCTCAAGCCCAGAGGAAGGATGTGA

GATATCGGATCCCGGGCCCGTCGACTGCAGAGGCCTGCATGCAAGCTTGGCGTAATCATGGTCATACCCTATAGTGAGTCGTATTACATGGTCATAGCTG

黑色：载体序列、红色：同源重组序列、绿色：EcoR V酶切位点、蓝色：ORF序列

蛋白简介

Catalyzes the hydroxylation of ent-sandaracopimaradiene at the C3alpha position to produce ent-3beta-hydroxy-sandaracopimaradiene, an intermediates for the biosynthesis of oryzalexin D and oryzalexin E phytoalexins (PubMed:22247270, PubMed:23795884). Catalyzes the hydroxylation of ent-cassadiene at the C3alpha position to produce 3alpha-hydroxy-ent-cassadiene, which may be an intermediate for the biosynthesis of phytocassane phytoalexins (PubMed:22247270). Catalyzes the hydroxylation of syn-pimaradiene (9-beta-pimara-7,15-diene) at the C3beta position to produce 3-beta-syn-pimaradiene (PubMed:25758958). Can hydroxylate ent-kaurene in vitro, but the product is not ent-kauren-19-ol as expected for ent-kaurene oxidase activity (PubMed:22247270).

蛋白质序列

>Ent-sandaracopimaradiene 3-hydroxylase (EC 1.14.14.70) (Cytochrome P450 701A8) (Ent-kaurene oxidase 4) (OsKO4) (Ent-kaurene oxidase-like 4) (OsKOL4) (OsKOS1) (Syn-pimaradiene 3-monooxygenase) (EC 1.14.14.68)

MESMLVAGAGAAAVAAVGGLVAAAALADKLVAAPPPRKNRANPPPAVPGLPIIGNLHQLKEKKPHQTFAKWSETYGPIYTIKTGASPVVVLNSTEVAKEAMIDKFSSISTRKLPKAMSVLTRKSMVAISDYGDYQKMAKRNIMIGMLGFNAQKQFRGTRERMISNVLSTLHKLVSLDPHSPLNFRDVYINELFSLSLIQSLGEDVSSVYVEEFGREISKDEIFDVLVHEMMMCAVEADWRDYFPYLSWLPNKSFDTIVSTTEFRRDAIMNALIKKQKERIARGEARASYIDFLLEAERSAQLTDDQLMLLLSESILAAADTVLVTTEWTMYEIAKNPDKQELLYQEIREACGGEAVTEDDLPRLPYLNAVFHETLRLHSPVPVLPPRFVHDDTTLAGYDIAAGTQMMINVYACHMDEKVWESPGEWSPERFLGEGFEVADRYKTMAFGAGRRTCAGSLQAMNIACVAVARLVQELEWRLREGDGDKEDTMQFTALKLDPLHVHLKPRGRM

关键词

Heme; Host-virus interaction; Iron; Membrane; Metal-binding; Monooxygenase; NADP; Oxidoreductase; Reference proteome; Transmembrane; Transmembrane helix


质粒图谱

产品说明

本产品是经过离子交换柱纯化后，装在无菌冻存管中通过真空干燥获得的2 μg连有Os06g37300 (CYP701A8)基因ORF的质粒DNA干粉。

保存：-20 ℃

使用说明

1、以5000 × g离心5 min；

2、打开冻存管，加入20 μL无菌水溶解DNA，并在室温下孵育10 min；

3、短暂涡旋冻存管，然后瞬时离心 (小于5000 × g)。

4、质粒溶液在-20℃下可稳定保存一年，请避免反复冻融。


扩增方案

1、收到质粒干粉后请先5000 rpm离心1 min，再加入20 μL无菌水溶解质粒，室温放置1 min；

2、从-80 °C冰箱中取出相应的感受态，置于冰盒上解冻，并做好标记；

3、取2 μL质粒加至100 μL感受态中，冰浴30min;

4、42 °C热激90 s，再冰浴2 min;

5、加入900 μL无抗的LB液体培养基，200 rpm震荡培养45 min;

6、5000 rpm离心5 min，仅留100 μL上清混匀菌体沉淀；

7、混匀后的菌液加至对应抗性的LB平板上，倒入适量玻璃珠，涂匀液体；

8、将平板正向培养1 h，再倒置培养12 h～16 h;

9、挑取单克隆菌落至对应抗性的LB液体培养基中，震荡培养12 h~16 h，根据实验需要提取质粒。

注意事项

1、同一个基因的单个转录序列可能由于发生自然变异 (例如核苷酸多态性)而有所不同，每一种都有其自身有效的存在。

2、该克隆被工程化，但表达取决于基因的性质。

3、本产品仅限于科学研究，不得用于临床诊断或治疗，不得用于食品或药品。

4、为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。

RAGP 网站：http://rice.uga.edu/cgi-bin/ORF_infopage.cgi?orf=LOC_Os06g37300

Uniprot 网站：https://www.uniprot.org/uniprotkb/Q0DBF4/entry

相关文献 (NCBI PubMed ID)

PMID : 16299167; 24280374; 15316288; 15075394; 22247270; 23795884; 25758958