STTM载体服务
STTM(STTM载体服务)是人工合成的一段短串联靶标模拟物,中间有一段48nt左右的特定核昔酸序列,两端分别有目标miRNA结合位点,每段miRNA结合序列包括3个非互补碱基(CTA),该序列能与目标miRNA结合形成非完全互补双链,从而有效地阻止miRNA与目的基因结合,使miRNA沉默,使目的基因表达量升高(Yan etaL, 2012)。
STTM技术是研究体内miRNA的有效工具,使miRNA的沉默,使miRNA的靶基因表达量升高,该技术已被广泛应用在拟南芥、水稻、番茄、大豆等miRNA的功能研究(Zhang et al., 2017)
STTM技术是研究体内miRNA的有效工具,使miRNA的沉默,使miRNA的靶基因表达量升高,该技术已被广泛应用在拟南芥、水稻、番茄、大豆等miRNA的功能研究(Zhang et al., 2017)
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背景说明
miRNA在调节植物代谢、生长发育和产量性状、生物和非生物胁迫响应、重金属胁迫响应等多种生物过程中发挥作用。由于miRNA基因较小,且大多数miRNA家族有多个成员,对miRNA的功能研究主要是通过过量表达miRNA或miRNA的靶基因来实现,难以通过传统的功能缺失突变体进行功能研究,而短串联靶标模拟技术(short tandem targets mimic,STTM)提供了另外一种可能。
实验简介
STTM是人工合成的一段短串联靶标模拟物,中间有一段48nt左右的特定核昔酸序列,两端分别有目标miRNA结合位点,每段miRNA结合序列包括3个非互补碱基(CTA),该序列能与目标miRNA结合形成非完全互补双链,从而有效地阻止miRNA与目的基因结合,使miRNA沉默,使目的基因表达量升高(Yan etaL, 2012)。该技术已被广泛应用在拟南芥、水稻、番茄、大豆等miRNA的功能研究(Zhang et al., 2017)。
服务流程
1 2 3 4 5 6 客户下单 材料确定 实验设计 STTM构建 遗传转化(可选) PCR鉴定(可选) 服务介绍
原始STTM载体中含有CaMV35S或Ubiquitin组成型表达启动子或其他启动子来启动转录单元的转录,载体上携带卡纳原核抗性和真核筛选抗性(可选潮霉素、Basta、G418或甘露糖进行筛选)。我们可以针对您的miRNA序列,设计引物后扩增预期片段,连入原始载体骨架,得到重组子后进行遗传转化实验,从而干扰miRNA。
原始载体名称 载体类别 骨架 原核抗性 真核抗性 服务周期 pBWA(A)HS-STTM 35S: :STTM pCAMBIA1300 Kan 潮霉素 四
个
工
作
日
pBWA(A)BS-STTM 35S: :STTM pCAMBIA3300 Kan 草丁膦 pBWA(A)KS-STTM 35S: :STTM pCAMBIA2300 Kan G418 pBWA(A)MS-STTM 35S: :STTM pUBI-C4300 Kan 甘露糖 pBWA(A)HU-STTM Ubi: :STTM pCAMBIA1300 Kan 潮霉素 pBWA(A)BU-STTM Ubi: :STTM pCAMBIA3300 Kan 草丁膦 pBWA(A)KU-STTM Ubi: :STTM pCAMBIA2300 Kan G418 pBWA(A)MU-STTM Ubi: :STTM pUBI-C4300 Kan 甘露糖 pBWA(A)H-STTM prormoter: :STTM pCAMBIA1300 Kan 潮霉素 pBWA(A)B-STTM promoter: :STTM pCAMBIA3300 Kan 草丁膦 pBWA(A)K-STTM promoter: :STTM pCAMBIA2300 Kan G418 pBWA(A)M-STTM promoter: :STTM pUBI-C4300 Kan 甘露糖 交付内容
1、重组载体的全序列信息和注释信息;
2、重组载体的酶切图谱;
3、重组载体的测序结果;
4、重组载体:一份质粒、一份大肠杆菌菌液(25%甘油菌)。 -
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技术服务载体构建,详见右侧说明
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