At4g32690 (GLB3) ORF Clone

别称：GLB3; At4g32690; F4D11.110

产品类型：ORF克隆载体

基因ID：At4g32690

转录本：AT4G32690.1

载体：pLinker1

抗性：kanR

ORF 长度：528 bp

蛋白长度：175 aa

蛋白分子量：20197 Da

片段物种：拟南芥（Arabidopsis thaliana）

NCBI gene ID：829404

Uniprot ID：Q67XG0 

基因摘要

Encodes a hemoglobin (Hb) with a central domain similar to the 'truncated Hbs of bacteria, protozoa and fungi. The 3D structure of these types of Hbs is a 2-on-2 arrangement of alpha-helices as opposed to the 3-on-3 arrangement of the standard globin fold. This type of Hb is not found in animals or yeast.

ORF 核苷酸序列

>At4g32690 (GLB3) ORF Clone

CTTAAGCTCGGTACCAAGCTTCCTCGAGGGCGCGCCCCGCGGAGATCTTCTAGAGAT

ATGCAATCGCTGCAAGATAAGGCATCGGTGTTAAGCGGCGTCGATCAGGCTGAGGCGTTCGCCATCGACGAGTCCAATCTGTTCGACAAGCTTGGTCTTCAGACATTCATCAACCTATCCACCAATTTCTATACCAGGGTATATGATGACGAAGAAGAATGGTTTCAATCAATATTTTCTAACTCTAACAAAGAAGATGCCATCCAAAACCAGTATGAGTTCTTTGTCCAGCGTATGGGAGGCCCTCCTTTGTATTCTCAGAGAAAAGGTCATCCTGCTTTGATCGGACGTCACCGTCCATTTCCAGTGACCCATCAAGCTGCTGAGAGATGGCTAGAGCACATGCAAAATGCTCTGGACGATTCGGTTGACATTGACCAGGACTCAAAAATCAAAATGATGAAGTTCTTTAGACACACCGCATTTTTCCTTGTGGCTGGAAACGAGCTGAAGAATCAGAATGAGAAACCGAAGCATAAGCCTCAATGTGCTTGTAAACACGCAGCCAATAAACCAGCAGAAGAATAA

ATCGAATTCGGGCCCACTAGTCCTGCAGGCGGCCGGGATCCGAGCTC

黑色：载体序列、红色：同源重组序列、蓝色：ORF序列

蛋白简介

Hemoglobin-like protein that exhibits an unusual concentration-independent binding of O(2) and CO. May promote shoot organogenesis from root explants in vitro (PubMed:11526234, PubMed:21741261). Inhibits RGLG3 and RGLG4 ubiquitination activity (PubMed:27497447).

蛋白质序列

>Two-on-two hemoglobin-3 (AtGLB3) (2-on-2 hemoglobin-3)

MQSLQDKASVLSGVDQAEAFAIDESNLFDKLGLQTFINLSTNFYTRVYDDEEEWFQSIFSNSNKEDAIQNQYEFFVQRMGGPPLYSQRKGHPALIGRHRPFPVTHQAAERWLEHMQNALDDSVDIDQDSKIKMMKFFRHTAFFLVAGNELKNQNEKPKHKPQCACKHAANKPAEE

关键词

3D-structure; Heme; Iron; Metal-binding; Oxygen transport; Reference proteome; Transport


质粒图谱

产品说明

本产品是经过离子交换柱纯化后，装在无菌冻存管中通过真空干燥获得的2 μg连有At4g32690 (GLB3) 基因ORF的质粒DNA干粉。

保存：-20 ℃

使用说明        

1、以5000 × g离心5 min；

2、打开冻存管，加入20 μL无菌水溶解DNA，并在室温下孵育10 min；

3、短暂涡旋冻存管，然后瞬时离心 (小于5000 × g)。

4、质粒溶液在-20℃下可稳定保存一年，请避免反复冻融。


扩增方案

1、收到质粒干粉后请先5000 rpm离心1 min，再加入20 μL无菌水溶解质粒，室温放置1 min；

2、从-80 °C冰箱中取出相应的感受态，置于冰盒上解冻，并做好标记；

3、取2 μL质粒加至100 μL感受态中，冰浴30min;

4、42 °C热激90 s，再冰浴2 min;

5、加入900 μL无抗的LB液体培养基，200 rpm震荡培养45 min;

6、5000 rpm离心5 min，仅留100 μL上清混匀菌体沉淀；

7、混匀后的菌液加至对应抗性的LB平板上，倒入适量玻璃珠，涂匀液体；

8、将平板正向培养1 h，再倒置培养12 h～16 h;

9、挑取单克隆菌落至对应抗性的LB液体培养基中，震荡培养12 h~16 h，根据实验需要提取质粒。

注意事项

1、同一个基因的单个转录序列可能由于发生自然变异 (例如核苷酸多态性)而有所不同，每一种都有其自身有效的存在。

2、该克隆被工程化，但表达取决于基因的性质。

3、本产品仅限于科学研究，不得用于临床诊断或治疗，不得用于食品或药品。

4、为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。