Taq DNA Polymerase Taq DNA 聚合酶
Taq DNA Polymerase是一种来源于嗜热菌Thermus aquaticus的高度热稳定的DNA聚合酶,95 ℃孵育时的半衰期大于40 分钟。Taq酶的分子量为94 kDa。Taq 酶可以催化5' 至3' 方向的依赖于DNA模板的脱氧核苷酸的聚合。Taq酶没有3' 至5' 的外切酶活性,有非常低的5' 至3' 外切酶活性。由于Taq酶没有3' 至5' 的外切酶活性,因此在DNA聚合过程中相当于核苷酸转移酶的作用,最终会导致PCR产物的3' 末端会产生 3'-dA overhangs,即产生带一个A的3' 粘端。
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产品名称Taq DNA 聚合酶
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产品英文名Taq DNA Polymerase
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储存条件-20℃
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保质期2年
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产品编号: QR1022S /QR1022M/QR1022L
制品编号和组分
货号
包装名称
规格
QR1022S
Taq DNA Polymeaser
200 U
QR1022M
Taq DNA Polymerase
1000 U
QR1022L
Taq DNA Polymerase
5000 U
制品内容
Taq DNA Polymerase (5 U/μl) 1000 U
10X PCR Buffer (with Mg 2+) 1mL×4
Taq DNA Polymerase简称Taq酶,是最常用的DNA聚合酶之一。
在74 ℃温度下反应30min,使得 10 nm dNTP掺入酸不溶性沉淀物所需要的酶量定义为1个活力单位。
100 mM Tris-HCl (pH 8.8 at 25℃); 500 mM KCl; 15mM MgCl2; 0.8% (v/v) Nonidet P40。
组分
使用量
10X PCR Buffer (with Mg 2+)
5 μL
Taq DNA Polymerase (5 U/μl)
0.5 μL
Primer1 (10 µM))
2 μL
Primer2 (10 µM)
2 μL
模板 DNA
X μL
dNTP Mix (10 mM each)
1 μL
ddH2O
Up to 50 μL
2)推荐反应程序:
温度
时间
循环数
95℃
3 min(预变性)
95℃
15 sec
30 - 35 cycles
60℃
15 sec
30 - 35 cycles
72℃
60 sec/kb
30 - 35 cycles
72℃
5 min(彻底延伸)
2. 酶量可在0.25 - 1 µl之间调整。加大酶量在通常情况下可以提高扩增产量,但有可能会使特异性下降;
3. 退火温度需要根据引物的Tm值进行调整,一般设置成低于引物Tm值3 ~ 5℃即可;对于复杂模板,需要调节退火温度和延长延伸时间来实现高效扩增;
4. 由于PCR反应非常灵敏可以扩增目的基因序列超过1000万倍,在使用Taq酶时请注意避免微量待扩增DNA的污染,并尽量考虑设置不加模板的空白对照以确认是否有待扩增DNA的污染;