EcoRV 限制性内切酶
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产品名称EcoRV
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产品用途切割质粒DNA、PCR产物、基因组DNA
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储存条件-20℃
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保质期2年
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制品编号与内容
制品编号
包装名称
规格
QR1021S
EcoRV（15U/μL）
1,500 U
QR1021M
EcoRV（15U/μL）
3,000 U
QR1021L
EcoRV（15U/μL）
15,000 U
产品简介
EcoRV 限制性内切酶是一种识别特点碱基序列的限制酶。能够精确完成DNA的切割，适用于切割质粒DNA、PCR产物、基因组DNA等。
保存及保质期：-20 °C，2年。
识别位点
5'...G A T | A T C...3'
3'...C T A | T A G...5'
活性单位定义
在 50 μl 反应液中，37℃温度下反应 1 h，将 1 μg 的 λ DNA完全分解所需的酶量定义为 1 个活性单位(U)。
1× Buffer CutS 组成
50 mM KAc, 20 mM Tris-HAc, 10 mM MgAc2, 100 μg/mLBSA, pH 7.9 @ 25°C
酶储存液
10 mM Tris-HCl, 50 mM NaCl, 1 mM DTT, 0.1 mM EDTA, 200 μg/mL BSA, 50% Glycerol（pH 7.4；25°C）
质量控制
（1）SDS-PAGE 检测蛋白纯度大于 95%。
（2）无核酸外切酶、核酸酶活性。
（3）PCR 检测无宿主基因组残留。
使用方法
1）推荐连接反应体系 (Total 20 μL)
组分
使用量
DNA
≤1 μg
10× Cut Buffer
2 μL
EcoRV（15U/μL）
1 μL
ddH2O
Up to 20 μL
2）反应条件：37 ℃温育 30 min。
3）反应终止：（热失活）80°C 加热 20 min。
注意事项
1. 添加酶切反应液时，应在冰上进行，EcoRV 应最后加入反应体系中，并且加入前须注意混匀反应体系；酶在使用完后应立即放入-20 °C保存；
2. 如果酶切的总反应体系大于 20 μL，应适当增加温育时间，尽量使用水浴、金属浴或沙浴；
3. 酶切后进行琼脂糖凝胶电泳验证时，建议添加上样体积 1/9 的 10× Loading Buffer 至 Loading Buffer 终浓度为 1× ，可以有效地分离酶与核酸，避免跑胶条带异;
4. 本产品仅限于专业人员的科学研究使用。
