拟南芥遗传转化服务
拟南芥(Arabidopsis thaliana)与油菜、萝卜、卷心菜等同为十字花科植物,又名鼠耳芥、阿拉伯芥、阿拉伯草,广泛用于植物遗传学、发育生物学和分子生物学的研究,是一种典型的模式植物。拟南芥植株较小、生长周期短(从发芽到开花约4-6周)、结实多(每株可产生数干粒种子)、具有明显的形态特征(利于突变体表型的观察)、基因组较小、遗传操作简便。经过不断的实践,浸花法(floral tip)已成为拟南芥遗传转化最常用的方法。
以花序作为转基因受体材料,用携带目标基因载体的农杆菌侵染花序,将T-DNA插入到基因组中,使用对应抗性的抗生素对种子进行筛选,获得抗性种子T0代,继续种植收获T1代种子(可选)。
客户在线下单—订单/实验材料确认—已有花序的拟南芥—农杆菌侵染花序—筛选—T0代种子—种植并筛选—检测苗—收T1代种子(可选项)—按客户需求快递转基因种子或苗。
服务内容 |
服务周期 | |||
普通转化 | 野生型 |
T0代种子或其抗性平板阳性筛选苗 |
80天左右 | |
抗性PCR鉴定及T1代种子 |
125天左右 | |||
指定要求T2,T3或T4代种子 |
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突变型 |
T0代种子或其抗性平板阳性筛选苗 |
125天左右 | ||
抗性PCR鉴定及T1代种子 |
165天左右 | |||
指定要求T2,T3或T4代种子 |
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CRISPR 载体转化 |
野生型 |
T0代种子或其抗性平板阳性筛选苗 |
80天左右 | |
鉴定成功突变及T1代种子 |
125天左右 | |||
指定要求T2,T3或T4代种子 |
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突变型 |
T0代种子或其抗性平板阳性筛选苗 |
125天左右 | ||
鉴定成功突变及T1代种子 |
165天左右 | |||
指定要求T2,T3或T4代种子 |
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精准基因编辑 载体转化 |
野生型 |
T0代种子或其抗性平板阳性筛选苗 |
85天左右 | |
鉴定成功突变及T1代种子 |
125天左右 | |||
指定要求T2,T3或T4代种子 |
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突变型 |
T0代种子或其抗性平板阳性筛选苗 |
125天左右 | ||
鉴定成功突变及T1代种子 |
165天左右 | |||
指定要求T2,T3或T4代种子 |
在实验开始、结题关键节点系统会自动发送短信到申请人手机进行告知,实验过程中客户可以随时登录客户管理系统查看项目实时进展情况。实验结题后,实验报告、检测结果可在线查看,并永久保留。实验过程用到的菌株、载体、受体材料免费为客户保存半年后销毁。

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基因合成
基因合成是生物学中一项最基本的、最常用的技术。对DNA调控元件、基因、途径乃至整个基因组的合成是验证生物学假设和利用生物学为人类服务的有力工具,与寡核苷酸合成有所不同:寡核苷酸是单链的,所能合成的最长片段仅为100nt左右,而基因合成则为双链DNA分子合成,所能合成的长度范围50 bp-12 kb。 基因合成是用人工方法合成基因的技术,是基因获取的手段之一,相对于从已有生物中获取基因来说,基因合成无需模板,因而不受基因来源限制。
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ORF克隆
ORF克隆是指从样本组织或细胞中抽提总RNA,反转录,设计合成特异性引物后,通过RT-PCR扩增获得目的基因的DNA序列,获得编码全长蛋白质序列的DNA序列:即从起始密码ATG到终止密码子,不含5′和3′UTRs非翻译区及内含子序列。
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载体构建
构建表达载体是基因工程的核心,但由于影响因素较多,使得高质量的载体很难获得。其云生物依托质粒库及基因合成技术、基因编辑等技术,可为您高效快速构建载体。
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STTM载体服务
STTM是人工合成的一段短串联靶标模拟物,中间有一段48nt左右的特定核昔酸序列,两端分别有目标miRNA结合位点,每段miRNA结合序列包括3个非互补碱基(CTA),该序列能与目标miRNA结合形成非完全互补双链,从而有效地阻止miRNA与目的基因结合,使miRNA沉默,使目的基因表达量升高(Yan etaL, 2012)。 STTM技术是研究体内miRNA的有效工具,使miRNA的沉默,使miRNA的靶基因表达量升高,该技术已被广泛应用在拟南芥、水稻、番茄、大豆等miRNA的功能研究(Zhang et al., 2017)
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定点突变
定点突变是指通过PCR等方法向目的DNA片段中引入所需变化,包括碱基的添加、删除、点突变等。定点突变能迅速、高效地提高DNA所表达的目的蛋白的性状及表征,是基因研究工作中一种非常有用的手段。